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Nov 27, 2023

Diversi e rari taxa microbici hanno risposto alle profondità della Deepwater Horizon

The ISME Journal volume 10, pagine 400–415 (2016)Citare questo articolo

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L’esplosione del pozzo petrolifero Deepwater Horizon (DWH) ha generato un enorme pennacchio di idrocarburi dispersi che ha sostanzialmente alterato la comunità microbica delle profondità marine del Golfo del Messico. È stato osservato un arricchimento significativo di popolazioni microbiche distinte, ma si sa poco sull’abbondanza e la ricchezza di ecotipi microbici specifici coinvolti nella biodegradazione di gas, petrolio e disperdenti a seguito di fuoriuscite di petrolio. Qui documentiamo una diversità precedentemente non riconosciuta di taxa strettamente correlati affiliati a Cycloclasticus, Colwellia e Oceanospirillaceae e descriviamo la loro distribuzione spazio-temporale nelle acque profonde del Golfo, in prossimità del sito di scarico e a distanza crescente da esso, prima, durante e dopo lo scarico. Un metodo computazionale altamente sensibile (oligotipizzazione) applicato a un set di dati generato dal pirosequenziamento di 454 tag delle regioni V4-V6 del gene dell'RNA ribosomiale 16S batterico, ha consentito il rilevamento delle dinamiche della popolazione a livello di unità tassonomica sub-operativa (somiglianza di sequenza dello 0,2% ). La firma biogeochimica dei campioni di acque profonde è stata valutata tramite il conteggio cellulare totale, le concentrazioni di alcani a catena corta (C1-C5), i nutrienti, il carbonio organico e inorganico disciolto (colorato), nonché i tassi di ossidazione del metano. L'analisi statistica ha chiarito i fattori ambientali che hanno modellato le dinamiche ecologicamente rilevanti degli oligotipi, che probabilmente rappresentano ecotipi distinti. I principali degradatori di idrocarburi, adattati alle infiltrazioni naturali di idrocarburi a lenta diffusione nel Golfo del Messico, sembravano incapaci di far fronte alle condizioni incontrate durante la fuoriuscita di DWH o erano superati nella concorrenza. Al contrario, taxa diversi e rari sono aumentati rapidamente in abbondanza, sottolineando l’importanza di sottopopolazioni specializzate e potenziali ecotipi durante massicci scarichi di petrolio nelle profondità marine e forse altre perturbazioni su larga scala.

Il più grande scarico di idrocarburi in oceano aperto della storia ha rilasciato quantità senza precedenti di gas e petrolio nelle profondità dell'oceano del Golfo settentrionale del Messico (di seguito denominato Golfo) in seguito all'esplosione e all'affondamento della piattaforma di perforazione offshore Deepwater Horizon (DWH) nel 2010 All'inizio dell'incidente DWH, prima che il tubo montante danneggiato venisse tagliato, l'iniezione di idrocarburi nella colonna d'acqua si è verificata come un getto pronunciato che emergeva dal tubo montante rotto, alterando la chimica delle acque profonde in prossimità della testa pozzo di Macondo. Il getto di petrolio e gas che ascendeva nella colonna d'acqua trascinava acqua di mare fredda (Johansen et al., 2001; Socolofsky et al., 2011) e generava un prolifico pennacchio di acque profonde ricco di idrocarburi che è stato rilevato a sud-ovest del pozzo dalla sua fluorescenza firma (Camilli et al., 2010; Diercks et al., 2010; Hazen et al., 2010) e profilo di diffusione della luce (Diercks et al., 2010), nonché da elevate concentrazioni di idrocarburi specifici (Camilli et al. ., 2010; Diercks et al., 2010; Valentine et al., 2010; Joye et al., 2011; Kessler et al., 2011b; Reddy et al., 2012) e del disperdente Corexit (Kujawinski et al., 2011). Il pennacchio di acque profonde si estendeva a profondità comprese tra 1.000 e 1.300 m, in una regione lunga almeno 35 km e larga 2 km (Camilli et al., 2010).

All’inizio dello scarico del DWH, le acque profonde colpite dagli idrocarburi hanno ospitato popolazioni batteriche significativamente arricchite legate a Oceanospirillum, Cycloclasticus, Colwellia, Pseudoalteromonas, Rhodobacterales e metilotrofi (Mason et al., 2012; Reddy et al., 2012; Redmond e Valentine , 2012; Valentine et al., 2012). Le osservazioni in situ e i risultati di laboratorio segnalano che questi batteri hanno svolto un ruolo chiave nella biodegradazione del petrolio nel pennacchio. I cambiamenti nella composizione nell’abbondanza di idrocarburi implicavano un utilizzo microbico preferenziale di alcani a catena corta e con peso molecolare più elevato derivati ​​dal petrolio (Valentine et al., 2010; Kessler et al., 2011b), mentre anomalie locali dell’ossigeno disciolto (Joye et al., 2011 ; Kessler et al., 2011a, 2011b) hanno indicato un'estesa respirazione aerobica degli alcani (Valentine et al., 2010; Crespo-Medina et al., 2014). Inoltre, il sondaggio degli isotopi stabili e la genomica di singole cellule hanno identificato popolazioni microbiche coinvolte nella degradazione degli idrocarburi o nell’arricchimento di geni metabolici che orchestrano la degradazione degli idrocarburi nel pennacchio, con Colwellia che probabilmente ossida l’etano e il propano (Redmond e Valentine, 2012), Oceanospirillum che degrada il cicloesano ( Mason et al., 2012) e Cycloclasticus che utilizzano idrocarburi policiclici aromatici (PAH) (Yakimov et al., 1998).

21 500 reads) and were therefore not rarefied. Rarefication for all other samples was calculated 100 times, generating 100 OTU tables that were averaged to present the mean rarefied observation of each OTU in each sample. Mann–Whitney–Wilcoxon analyses verified that rarefied data were not statistically different from the unrarefied data (P=0.8252). Alpha diversity indexes were calculated for the non-rarefied OTU table, a random rarefied OTU table and the averaged (100 calculations) rarefied OTU table. The diversity estimates (Supplementary Table S4) changed only slightly between the non-rarefied and the rarefied OTU tables. To retain information for oligotyping, we proceeded with the non-rarefied OTU table. We converted sequence observations to relative abundance data, scaled from 0 to 100% of the community, and Morisita–Horn beta diversity indexes were calculated for all OTUs and all oligotypes (see below), as well as for Colwellia, Oceaniserpentilla, Cycloclasticus and SAR11 oligotypes, separately./p>450 bp), so we limited high-entropy locations of interest to the lowest noise areas in the V6, V5 and the end of V4 regions. We retained oligotypes that were observed in a minimum of 10% of samples in which the genus appeared, were 0.1% or more abundant in at least one sample, and in which the most abundant unique sequence was 0.05% of all reads in that genus. A detailed example of the oligotyping procedure is described in the Supplementary Materials./p>10 μM and/or water depths between 1000 to 1300 m (during the discharge), whereas ‘non-plume samples’ exhibited lower methane concentrations but still held evidence of impact by the DWH oil discharge (methane concentrations >10 nM but <10 μM and water depths above 1000 m or below 1300 m). To compare plume populations with native oil-degrading bacterial communities, we obtained deepwater samples from two natural hydrocarbon seeps, MC118 and GC600 (Orcutt et al., 2005; Bowles et al., 2011)./p>5% relative abundance during the DWH oil spill; Figure 4) appeared strikingly diverse in the 16S rRNA gene tree and sequences scattered throughout the Colwelliaceae opposed to the formation of phylogenetically distinct clusters. The detected phylogenetic diversity of Colwellia during the DWH oil spill likely reflects the physiological diversity of this group and their ability to respond to a range of environmental conditions. Interestingly, Colwellia sp. RC25 isolated with MC252 oil from DWH-contaminated waters (Bælum et al., 2012) is not closely related to any of the taxa detected during the DWH oil discharge in previous reports or any of the Colwellia oligotypes reported here (Figure 4). Although the cultivar Colwellia sp. RC25 (Bælum et al., 2012) serves as a valuable model organism, its physiology (for example, substrate preferences, optimal growth conditions and activity) may not reflect that of the Colwellia ecotypes that dominated during the DWH discharge./p>

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